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糖化血紅蛋白及其檢測
發布時間:2019-02-14 最后編輯時間2019-02-14 瀏覽次數:554次 來源:

        近年來糖化血紅蛋白(HbA1c)正日益受到臨床的高度重視,糖化血紅蛋白(HbA1c)是血紅蛋白A組分的某些特殊分子部位和葡萄糖經過緩慢而不可逆的非酶促反應結合而形成的,當血液中葡萄糖濃度較高時,人體成的糖化血紅蛋白含量也會相對較高。人體內紅細胞的壽命一般為120天,在紅細胞死亡前,血液中糖化血紅蛋白含量也會保持相對不變。

.  糖化血紅蛋白

        糖尿病是一組病因和發病機制尚未完全明了的內分泌代謝性疾病,目前發病率僅次于心腦血管疾病和腫瘤在我國糖尿病發病率為2-3%,并以每千分之一的速度增長。目前臨床已廣泛開展檢測患者血糖工作。但血糖測定只代表即刻的血糖水平,提示患者當時的身體狀況,并不能作為評價疾病控制程度的指標。
       因此糖化血紅蛋白水平反映的是在檢測前120天內的平均血糖水平,而與抽血時間,病人是否空腹,是否使用胰島素等因素無關,是判定糖尿病長期控制的良好指標。它反映48周的體內血糖的平均水平,并可能是造成糖尿病并發癥的一個重要原因。

      糖化血紅蛋白的測定結果以百分率表示,指的是和葡萄糖結合的血紅蛋白占全部血紅蛋白的比例。非糖尿病患者的糖化血紅蛋白的水平為4-6%;許多研究發現,糖尿病患者如果能將糖化血紅蛋白水平降低至8%以下,糖尿病的并發癥將大大降低。如果糖化血紅蛋白>9%,說明患者持續性高血糖,會發生糖尿病性腎病,動脈硬化,白內障等并發癥,并有可能出現酮癥酸中毒等急性合并癥。因此,專家建議,如果糖尿病患者血糖控制已達標準,并且血糖控制狀態較為平穩,每年至少應該接受2次糖化血紅蛋白檢測;對于那些需要改變治療方案,或者血糖控制狀態不穩定的患者,及正在進行胰島素治療的患者,應該每三個月進行一次糖化血紅蛋白測定。
      糖化血紅蛋白的檢測可以指導臨床更好地制定糖尿病患者的診療方案。如果某位患者每天僅在早餐前測定空腹血糖,發現這個值為130mg/ml,處于正常范圍內;但再檢測糖化血紅蛋白卻發現為11%,這意味著該患者在過去的3個月內,平均血糖水平已接近270mg/ml,暗示其將來發生糖尿病并發癥的危險性非常高。盡管早餐前血糖結果尚滿意,但是一天其它時間的血糖水平卻嚴重超標,需要對患者飲食,運動及藥物治療作出重新評估,并作出相應調整,此外患者還需較現在更為頻繁地測定血糖。 

.  檢測方法

        糖化血紅蛋白檢測方法很多,常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等。 

1. 離子交換層析

       分手工和儀器兩種。手工微柱操作受到人工因互影響,可能會洗脫不完全或過度洗脫,并受外界環境溫度的影響,而某些紅蛋白如HbF異常增加時,也會與糖化血紅蛋白同時洗脫肉而使結果產生偏差。采用微柱法離子交換層析和梯度洗脫胎技術可分離血紅蛋白的變異體與亞型,除可測定糖化血紅蛋白外,還可同時檢測出HbSHbC的存在與否,在計算糖化血紅蛋白值時扣除變異體產生和影響,從而使結果更為準確、可靠,CV值小于2%。同時儀器配有專門的稀釋溶血器,可直接進行全血操作,5分鐘即可報告結果,并儲存樣品的檢測結果,層析柱價格也較為低廉。適合于較多標本的醫院檢測。更大型的儀器除可測定糖化血紅蛋白外,還可分離檢測血紅蛋白的600多種子變異體和亞型,用于地中海貧血等疾病的診斷。 

 2. 親和層析

       是目前糖化血紅蛋白檢測的新方法,該方法特異性強,只需10ul全血即可在4分鐘內快速分離檢測糖果化血紅蛋白,為臨床提供即時的化驗結果,從而使醫生在患者就診的第一時間明確診斷并制定相應的治療方案,特別適合于臨床科室使用,尤其對小兒患者而言更有優勢。其檢測結果也完全達到并超過臨床要求,CV5%以內。 

 3. 高效液相色譜方法

       儀器可全分離測定糖化血紅蛋白及血蛋白的變異體和亞型,優點是檢測速度快,精度高,CV值小于1%。是目前世界上公認的糖化血紅蛋白檢測的金標準。儀器保養簡單,價格相對低廉,操縱性能強。 在糖化血紅蛋白領域具有一定權威性。 

4. 免疫凝集法

       原理是糖化血紅蛋白與相應的單抗結合進而發生凝集反應,通過測定吸光度來表示凝集量,可用于全生化分析儀上進行測定。專用的儀器要求對樣品成批試驗。每次試驗均應使用一個新試劑盒,操作前應注意混勻試劑。指出的是免疫凝集法測定糖化血紅蛋白,精密度較差,CV值一般大小6%

 5. 離子捕獲法

       亦是新近發展起來的新方法,其原理是糖化血紅蛋白與相應抗體結合后,聯以熒光標記物,而在IMX反應孔中的玻璃纖維預先包被了高分子的四胺合物,使纖維表面帶正電,使前述的反應復合物吸附在纖維表面,經過一系列的清洗后測定其熒光強度,從而得到糖化血紅蛋白的濃度,該方法適用于成批糖化血紅蛋白標本的檢測。

 6. 毛細管電泳方法

       毛細管電泳方法也能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白質的變異體,但目前尚無商品化,具有批量樣本通過能力的儀器面世,相當程度地限制了該方法的臨床應用。

       金標法的糖化血紅蛋白儀,CV值小于5%

        綜上所述,糖化血紅蛋白是糖尿病患者疾病控制程度一項良好的指標,糖尿病患者應定期檢測糖化血紅蛋白,并據此制定,修正相關治療方案。各醫院可根據自身標本的多少,選擇使用有關糖化血紅蛋白的檢測儀器,開展該項目的檢測。

  

. 檢測意義

 
1. HbA1c的測定

       可協助判斷預后糖尿病合并視網膜病的病人,其HbA1c8%-10%,表示病變中等程度,可用激光進行治療;若大于10%則為嚴重病損,預后差。對妊娠性糖尿病,判斷是否致畸、死胎和子癇前期則更有意義,故測定HbA1c妊娠糖尿病控制的重要參數。

2. 糖尿病的診斷

       健康人HbA1c4.0%-7.7%(6.5±1.5%), 未控制的DM病人HbA1c可高達10%-20%;隨機檢測HbA1c,若9%,預報糖尿病的標準度約為78%,靈敏度為68%,特異性94%HbA1c>10%,則有80%以上為糖尿病,靈敏度43%,特異性99%,有效率86%。所以,目前并不主張單獨用HbA1c來診斷糖尿病,原因是精確度不高,有時造成臨床解釋困難。

3. 掌握控制程度

       血糖測定只代表即刻的血糖水平,提示患者當時的身體狀況,并不能作為評價疾病控制程度的指標。

4. 控制的評價指標

       作為糖尿病患者長期血糖控制的評價指標;糖化血紅蛋白(HbA1c)的測定目的在于消除波動的血糖對病情的控制觀察的影響,因而對血糖波動較大的Ⅰ型糖尿病患者,測定糖化血紅蛋白(HbA1c)是一個有價值的血糖控制指標。對于2型糖尿病患者,血糖和尿糖測定較簡單和經濟,且能較可靠地反映病情的控制,故測定糖化血紅蛋白(HbA1c)的意義低于1型患者,但可作為輔助檢查,用于判定口服藥是否失效而須用胰島素治療。

5. 應用

       糖尿病是一組病因和發病機制尚未完全明了的內分泌代謝性疾病,目前臨床已廣泛開展檢測患者血糖工作。但血糖測定只能代表即刻的血糖水平,提示患者當時的身體狀況,并不能作為評價疾病控制程度的指標。因此糖化血紅蛋白水平反映的是在檢測前120天的平均血糖水平,與抽血時間,病人是否空腹,是否使用胰島素等無關,是判定糖尿病長期控制的良好指標。糖化血紅蛋白儀就是用來檢測糖化血紅蛋白含量的儀器。它的應用很廣泛:

 第一,用于糖尿病的診斷:健康人的HbA1c4.0%-7.7%, 未控制的DM病人HbA1c可高達10%-20%;隨機檢測HbA1c,若9%,預報糖尿病的標準度約為78%,靈敏度為68%,特異性94%HbA1c>10%,表示有80%以上為糖尿病,靈敏度43%,特異性99%,有效率86%。所以,目前并不主張單獨用HbA1c來診斷糖尿病,原因是精確度不高。

 第二,對HbA1c的測定:可協助判斷預后糖尿病合并視網膜病的病人,其HbA1c8%-10%,表示病變中等程度,可用激光進行治療;若大于10%則為嚴重病損,預后差。對妊娠性糖尿病,判斷是否致畸、死胎和子癇前期則更有意義,故測定HbA1c是妊娠糖尿病控制的重要參數。

 第三,有助于糖尿病慢性并發癥的認識:血糖測定只代表即刻的血糖水平,提示患者當時的身體狀況,并不能作為評價疾病控制程度的指標。

 第四,是血糖控制的評價指標:作為糖尿病患者長期血糖控制的評價指標;糖化血紅蛋白(HbA1c)的測定目的在于消除波動的血糖對病情的控制觀察的影響,因而對血糖波動較大的Ⅰ型糖尿病患者,測定糖化血紅蛋白(HbA1c)是一個有價值的血糖控制指標。對于2型糖尿病患者,可作為輔助檢查,用于判定口服藥是否失效而須用胰島素治療。 

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